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植物總糖和還原糖檢測(cè)試劑盒(DNS比色法)檢測(cè)原理是還原糖在堿性加熱條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系，在540nm處用分光光度計(jì)測(cè)定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的還原糖和總糖的含量。
價(jià)格：￥15.00
規(guī)格：反應(yīng)
貨號(hào)：ST1545
品牌：LEAGENE
服務(wù)介紹：
植物總糖和還原糖檢測(cè)試劑盒(DNS比色法)檢測(cè)原理是還原糖在堿性加熱條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系，在540nm處用分光光度計(jì)測(cè)定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的還原糖和總糖的含量。
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
ST1545 | 植物總糖和還原糖檢測(cè)試劑盒 | 反應(yīng) | 15元 |
實(shí)驗(yàn)流程：
還原糖的提?。?/span>
①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②50℃水浴30min，并不時(shí)攪拌，以便還原糖徹底浸出。
③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管，4000g離心5min。
④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。
⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測(cè)液。
總糖的水解和提?。?/span>
①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時(shí)攪拌。
③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液(約50ul)，檢查水解是否完全，如已經(jīng)水解完全，則不顯示藍(lán)色。
④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min。
⑤取上清或?yàn)V液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取0.5ml總糖水解液，測(cè)定其還原糖的含量。
稀釋葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)：取干凈離心管，按下表操作，依次獲得系列濃度的Glu標(biāo)準(zhǔn)。
加入物質(zhì)(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Glu標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
蒸餾水 | 0.4 | 0.3 | 0.2 | 0.1 | 0 |
標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖濃度(mg/ml) | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
加樣：取5ml離心管，按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡，小心混勻；如果樣品中的糖濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2~3平行管，求平均值。
加入物(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
蒸餾水 | 0.5 | － | － |
系列Glu標(biāo)準(zhǔn)(1~5號(hào)) | － | 0.5 | － |
提取液 | － | － | 0.5 |
DNS檢測(cè)液 | 1 | 1 | 1 |
沸水浴中準(zhǔn)確煮沸5min，取出，自來水冷卻至室溫。補(bǔ)加蒸餾水2.5ml。 | |||
還原糖測(cè)定：混勻，以空白管調(diào)零，比色杯光徑1cm，分光光度計(jì)測(cè)定540nm處標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管的吸光度。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運(yùn)輸要求：
植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)
準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定。
僅供科研用途，不可用于臨床診斷！
